一、課程簡介:本課程主要針對農藝所作物組研究生開設,介紹基因選殖中 DNA 操作部份,特別針對水稻(真核)genomic DNA 操作技術部分加強指導。內容從最基本之 DNA 與 RNA 分辨、質粒萃取、分子選殖基本操作開始,介紹真核植物 genomic DNA 操作與質粒 DNA 操作之異同,最後以非放射標定探針方法執行水稻 DNA blotting。
由於空間問題,學生人數期望在八人以下,有興趣的同學請先電4118。
二、先修課程:
三、參考書目:自編講義
課程大綱及進度:
一學期十八週,各週教學主題如下:
1. Introduction and material preparation
2. Plasmid purification
3. DNA and RNA
4. Restriction enzyme
5. Band intensity and size calculation
6. Restriction map
7. Gel Extraction
8. DNA ends modification
9. PCR & E. coli transformation
10. Vector & Insert
11. How to identify orientation
12. Genomic DNA purification
13. Genomic DNA quality and quantity
14. Southern blotting — DNA treatment
15. Labeling and hybridization
16. Colony/plaque hybridization
17. DNA blotting — detection
18. Quiz
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